Közvetlen immunfluoreszcencia kimutatás

A szövet szerkezeteinek, az ellenanyagoknak és a kórokozóknak az immuncímkézés révén történő bizonyítása népszerű, modern és pontos. Az immunfluoreszcencia az immun jelölésre vonatkozik az elkészített, fluoreszcens antitestekkel, amelyek UV-fényben izzásra késztetik őket.

A Közvetlen immunfluoreszcencia kimutatás a szubsztrátot közvetlenül megvizsgáljuk fényes antitestekkel, primer ellenanyagok vagy mesterséges antigének nélkül.

Mi a közvetlen immunfluoreszcencia kimutatás?

A közvetlen immunfluoreszcencia-detektálás egy immunológiai, immunfestési és immunhisztokémiai ismereteken alapuló diagnosztikai módszer. A hangsúly itt az antitestek azon képességére vonatkozik, hogy kötődjenek a szövet specifikus pontjaihoz vagy a szérum antigénjeihez. Ezek a helyek epitópok.

A biokémiai diagnosztikában vannak olyan mesterséges antitestek vagy mimetikumok (szinguláris: mimetikumok), amelyek lehetővé teszik, hogy ezeket az antitest-antigénkötéseket fluoreszcencia vagy radioaktivitás jellemezze. A mesterséges antitest konjugátumok egyrészt az epitópokhoz kötődnek, másrészt immunfluoreszcencia esetén fluoreszcens markerrel rendelkeznek. Ez alternatívája a radioaktív markerek használatának. Az immunfluoreszcencia közvetlen detektálása a közvetett detektáláshoz képest az a különös, hogy az ellenanyag, amely a vizsgált anyagban az antigén epitópjához kötődik, a fluoreszcens markerrel konjugált antitestet is képviseli. A közvetlen kimutatáshoz további antitestek nem szükségesek.

Az UV fényben ragyogó fluoreszceint és a fluoreszcein-izotiocianátot (FITC) használják színezékekként a mesterséges antitest konjugátumok immunfluoreszcenciában történő előállításához. Eddig kissé bonyolult, de a közvetlen immunfluoreszcencia kimutatás a szokásos orvosi laboratóriumi diagnosztikai módszer sokféle orvosi kérdéshez. A fluoreszcens festékkel antitestek eladásra készek.

Funkció, hatás és célok

Az immunfluoreszcencia közvetlen detektálása elérhető szöveti vizsgálatokban a szövetek bizonyos struktúráinak megfestésére. De egyedi cellákhoz is rendelkezésre állnak. Az áramlási citometria nagy szerepet játszik itt. Végül vannak szilárd és folyékony fázisú immuntestek. A szövetek immunfluoreszcencia vizsgálata különösen fontos az onkológiában, azaz a rákos betegségek orvosi kezelésében.

A tumorspecifikus antigének a tumorszövetben közvetlenül kimutathatók immunfluoreszcenciával. A daganatok szövetmintáin végzett ilyen vizsgálatok gyakran fontosak annak megállapításához, hogy a meglévő áttétek honnan származnak a testben, vagy annak megítéléséhez, hogy a daganat jóindulatú vagy rosszindulatú-e. Az egyes sejtek közvetlen immunfluoreszcencia detektálással történő vizsgálatával vírusantigének, bakteriális antigének és más epitópok találhatók.

Például megtudhatja, hogy a sejteket vírus fertőzte-e meg, és a fertőzési ciklus melyik szakaszában vannak a sejtek. A FACS név (= fluoreszcencia-aktivált sejtrendezés) egy nagyon hatékony áramlási citometriás módszer, amelyben a fluoreszcenciával megjelölt sejteket a szín típusától függően különböző tesztcsövekbe osztják el. Ez az eljárás fontos immunológiai, hematológiai és fertőző betegségekben.

Az immunfluoreszcencia immuntestek lehetővé teszik a környezeti toxinok, géntechnológiával módosított szervezetek és bizonyos élelmiszer-adalékanyagok közvetlen kimutatását. Ebben a kísérleti eljárásban mindig van egy szilárd és folyékony fázis. Számos kórokozó, köztük az AIDS-t okozó HIV-vírus szintén közvetlenül kimutatható. A fertőző és autoimmun betegségek kimutatásakor azonban gyakran antitestek és nem antigének kimutatásának kérdése. Ezek a test immunrendszere által alkotott védelmi molekulák. Az itt bemutatott meghatározás szerint az ilyen bizonyítékok nem közvetlen bizonyítékok, mivel a fluoreszcens antitestek nem közvetlenül kapcsolódnak a test saját antigénjeihez, hanem a teszt elrendezésének antigéneihez.

Ezek a kísérleti felépítésben szereplő antigének viszont kapcsolódnak a test saját antitesteihez. A gyakori fertőzések, például a HIV-vírusok és a chlamydia immunfluoreszcencia közvetlen kimutatását csak speciális kimutatási és megerősítési tesztekben használják. Vannak tesztek még sok más betegségre. A legtöbb esetben az antitestek közvetett kimutatása alkalmasabb a fertőző betegségek kezelésére, mivel a test saját immunrendszere ötletes képességgel rendelkezik a korábbi fertőzések emlékezetére. Más esetekben az antigének közvetlen detektálása és az antitestek közvetett kimutatása kiegészítik egymást. Az utóbbi azt mutatja, hogy fertőzés történt már korábban, míg az előbbek pontosabb információkat szolgáltatnak a kórokozó aktivitásának jelenlegi állapotáról.

Itt megtalálja gyógyszereit

Kockázatok, mellékhatások és veszélyek

A közvetlen immunfluoreszcencia-detektálással, akárcsak az összes orvosi bizonyítékkal, kétféle kockázat áll fenn: a hamis, pozitív eredmény kockázata és a hamis, negatív eredmény kockázata. A hamis, pozitív eredmények pszichológiai kellemetlenséget és nagy stresszt okoznak a beteg számára.

Ezért további vizsgálati eljárásokat adnak a pozitív eredményekhez, különösen, ha a diagnózis drasztikus életváltozásokhoz vezet. A téves, negatív eredmény kockázata az, hogy a beteg időben nem ismeri meg saját egészségének és talán még a közegészségnek a veszélyét is. Ezért jó, hogy sok kutatást végezzen, és nagyszámú, különböző immunfluoreszcenciás közvetlen detektálást készítsen és kínáljon eladásra készen. A betegségek és patológiák más közvetlen és közvetett kimutatási módszereivel együtt ez növeli a diagnózis pontosságát.

A közvetlen kimutatás az antitest konjugátumon alapszik, amely egyrészt az antigének epitópjaihoz kötődik, másrészt a fluoreszcenciát is okozza. Ezért egy ilyen terméket csak egy típusú vizsgálati eljárásban használnak, és más típusú vizsgálati eljárásnál nem.Ez egy fontos eljárási különbség a közvetett detektáláshoz képest, amelyben a fluoreszcens antitesteket epitópkötéshez elsődleges antitestek megelőzik. Az antitest konjugátum tehát alkalmas különféle tesztekre. Ez az eljárási különbség különbözik az antitestek közvetett kimutatása és az antigének közvetlen kimutatása közötti orvosi különbségektől.